Author: 〇滝口 涼美麗1,2、桑田 啓貴2、森崎 弘史2、鈴木 規元1、逸見 百江2
Affiliation: 1昭大 歯 歯内治療、2昭和大 歯 口腔微生物
Abstract: 近年、常在細菌叢の構成異常、いわゆるディスバイオーシスが健康維持や疾患発症と密接に関与することが知られている。口腔においてもディスバイオーシスが歯周病などの口腔疾患等と密接に関わることが明らかにされつつある。菌叢変化を調べる手法としては、通常、次世代シークエンサーが用いられるが、コストやデータ解析などが課題となっている。口腔免疫系は口腔細菌叢と密接に相互作用しており、特に唾液抗体は口腔細菌を標的とし、特異的に産生・誘導されると考えられる。今回、我々はこの唾液抗体(sIgAおよびIgG)と口腔最近の結合を定量的・定性的に調べることで、ディスバイオーシスを調べるとり簡便な検査方法の開発を目指した。まず、Streptococcus mutansやS.oralisなどの口腔細菌のLPXTGモチーフを有する菌体表層タンパク質のリコンビナントタンパク質を作成し、ウサギ免疫することでポリクロナール抗体を作製した。続いて、得られた抗体を共有結合により蛍光色素で標識し、検出抗体を作製した。最後に、純培養した口腔細菌を検出抗体と反応させ、各細菌と特異的に結合するかを、フローサイトメトリー(FCS)を用いて調べた。その結果、口腔細菌検出抗体との特異的な結合が確認された。また、ヒト被験者の唾液検体遠心分離により得た細菌サンプルに、検出抗体および抗ヒトIgA抗体や抗ヒトIgG抗体と反応させ、同様にFCMにより解析したところ、被験者のの年齢や口腔衛生状態などによって、異なるプロファイルが得られた。以上のことから、口腔細菌に対して結合する抗体の量や種類の変化が口腔細菌叢異常を評価する指標となる可能性が示唆された。最終的には抗体を使用したディスバイオーシスの評価法のためのプロトコール確立を目指す。
メールで問い合わせ
[1-P2-PM39] 唾液を検体とした口腔健康状態評価法の開発
微生物0
コメント